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酶標儀在醫學領域的應用
點擊次數:3594 更新時間:2013-11-13
  hbzhan內容導讀:酶聯免疫檢測儀,是酶聯免疫吸附試驗的儀器。可簡單地分為半自動和全自動2大類,但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一個比色計,即用比色法來分析抗原或抗體的含量。ELISA測定一般要求測試液的zui終體積在250ul以下,用一般光電比色計無法完成測試,因此對酶標儀中的光電比色計有特殊要求。
  
  目前在國內血站臨床試驗室中,酶聯免疫吸附試驗已成為zui主要的免疫測定技術,由于大部分ELISAzui后以比色測定,使酶標儀成其它各類型酶標儀為ELISA測定的重要工具。八十年代初,當酶免疫測定技術從國外引進時,基本上均使用肉眼判斷結果,難以滿足臨床測定要求。目前國內醫院和血站實驗室所使用的酶標儀絕大部分為進口儀器,品種型號多達數十種。
  
  軟件功能是酶標儀所具有的對ELISA定性和定量測定及其他測定方式如酶動力學、紫外、凝集等的統計分析并報告結果的功能,是判斷酶標儀質量的一個指標。ELISA測定,酶標儀需具有陽性判斷值(Cutoff)及測定灰區的統計計算功能,如血站實驗室篩選獻血員進行抗-HCV、HBSAG、抗-HIV測定時,常遇到測定吸光度處于Cutoff附近,但又低于Cutoff的樣品,這樣的血輸給患者導致輸血后傳染疾病的可能性增大。若設定灰區,以灰區下限作為判斷標準,可減少輸血后傳染疾病的可能性。此外四參數測定的劑量反應曲線適合于定量酶免疫測定曲線的擬合。因此,如果目的為定量測定,要有這種曲線回歸方程計算分析功能。其他如連點、直線等回歸計算,可根據酶標儀的應用目的而定。
  
  丙氨酸氨基轉移酶(ALT)的測定,是對獻血者*的篩查項目之一。方法上有速率法和賴氏法等。若采用賴氏試管法,費工、費時,不但從方法上得不到統一,而且不利于計算機對原始數據的網絡化管理。若采用微板酶標儀定量(U/L)方法,利用酶標儀與計算機接口,聯接血站局域網絡,這就同其他酶法檢測項目一樣,實現了實驗室原始數據的計算機管理。
  
  采用試管法檢測Rh血型,操作繁鎖,肉眼判讀結果缺乏客觀性。故將平底微板法與酶標儀掃描,電腦自動判讀打印技術相結合,用TCEAN全自動加樣分析系統完成。經常規13032份標本的檢測,符合率達100%。利用酶標儀法檢測Rh血型具有較好的重復性、準確性,操作簡便快速、判讀結果客觀可靠,也易于原始結果的保存,提高自動化程度,能的篩選獻血者,有利于實驗室的標準化管理,也有利于血站稀有血型庫的建立。
  
  生長曲線一般指菌落總數CFU/mI。或者菌落總數的對數logCFU/ml。隨時間變化曲線,可用來展示微生物生長情況和新陳代謝規律。由于受試菌數量/濃度與菌懸液的光學密度(opticaldensity,OD)值成正比,所以生長曲線也常用OD-t曲線表示。目前菌懸液OD值主要通過可見分光光度計測定,其在評價微生物生長狀態時可以得到滿意的結果。但是該方法存在一定缺點:即時性差;需反復采樣,操作繁瑣;取樣和檢測過程中培養基容易感染雜菌;作為懸濁液,細菌有一定的沉降速率,檢測時間的長短會對OD值產生影響,導致實驗再現較為困難[7]。由于酶標儀是一種快速、準確、高通量的儀器,所以我們總會選擇使用酶標儀來進行菌懸液OD值的測定,來提高工作效率,節約時間。
  
  除測定菌懸液OD值外,酶標儀還可用來檢測細菌濃度。例如:各類紡織品與人類生活關系密切,其表面附著的微生物可能是疾病傳播的重要媒介或與體表微生物相伴形成一種有機的微生態關系[8]。隨著時代的發展,各種抗菌織物產品不斷出現,但對評價抗菌紡織品的
  
  抑菌效果尚無規范的方法,所以,建立一種科學評價織品抗菌效果的方法對衛生微生物學和微生態學研究均具有重要價值。由于活菌計數誤差較大而且工作繁瑣,不適用于大批量標本的檢測,因而利用酶標儀檢測細菌濃度便可建立檢測織品抑菌效果的有效方法。
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